現(xiàn)在,市面上能見到的顯色培養(yǎng)基大多用于食品和臨床,但HiMedia廠家生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基覆蓋面廣,能用于供水行業(yè)和環(huán)境監(jiān)測站。下面為您介紹一下。
顯色培養(yǎng)基的評價常有多個指標,如靈敏度,特異性等,它們也與所檢測的樣本類型有關。生產(chǎn)廠家經(jīng)常不提供這些指標。但一些第三方檢測中心或研究機構(gòu)對此則有相關研究,并發(fā)表在專業(yè)期刊上。
2011年,《學術(shù)研究期刊》發(fā)表了一篇對顯色培養(yǎng)基的比較研究。作者來自埃及國家研究中心水污染研究部,他們通過用顯色培養(yǎng)基檢測了水中的單核細胞增生李斯特氏菌,對顯色培養(yǎng)基進行了評價(見參考文獻1)。
作者指出,單核細胞增生李斯特菌是廣泛存在的食品致病菌,致死率較高(>20%)。它從家禽、鱒魚、壁虱、甲殼類,水、污水、植被、食品中已能被分離出來。對于人類而言,食品和水是常見的致病源。
傳統(tǒng)的培養(yǎng)法分離李斯特菌屬費力耗時,需要增菌乃至預增菌使水中低豐度的單增李斯特菌得到恢復。顯色培養(yǎng)基的出現(xiàn)可改善這一檢測方法。
研究者收集了尼羅河地表水的60個水樣本。收集水平遵照了200年APHA發(fā)布的指南。所有水樣均收集在無菌的1L玻璃瓶中(Simax品牌,捷克共和國產(chǎn)),并在4℃條件下運輸?shù)綄嶒炇?。所有樣品在收集?小時內(nèi)進行細菌學檢查。
研究用的單增李斯特氏菌標準菌株編號為NCTC 10890。研究者采用了HiMedia公司生產(chǎn)的HiCrome Listeria Agar Base(以下簡稱HLA)。這款顯色培養(yǎng)基基于李斯特菌*的β葡萄糖苷酶與鼠李糖發(fā)酵。β葡萄糖苷酶裂解顯色底物,使得李斯特菌屬菌落呈現(xiàn)藍色,而其他菌屬為白色。李斯特菌的內(nèi)部鑒別是基于鼠李糖發(fā)酵。單核細胞增生李斯特菌為藍綠色菌落。研究者還采用了另一個公司生產(chǎn)的BBL CHROMagar顯色培養(yǎng)基(以下簡稱BBL)。
研究遵循了2005年APHA指南,采用薄膜過濾法對單核細胞增生李斯特氏菌進行了檢測和計數(shù)。濾膜放置在培養(yǎng)基上,37℃倒置孵育24小時。對典型菌落計數(shù),單位為CFU/100 ml。菌落的進一步確證采用PCR法。終計算得出靈敏度(真陽性率)、特異性(真陰性率)、總有效率(即(真陽性+真陰性)×100/總數(shù)),并進行統(tǒng)計學分析(t檢驗)。
結(jié)果見表1、表2、表3和表4。
表1. 在不同培養(yǎng)基上,單增李斯特氏菌標準菌株的菌落特征
菌株 | 培養(yǎng)基 | 陽性菌落 | 正確數(shù) (%) | 假陰性菌落 | 假陰性數(shù)(%) |
單核細胞增生李斯特氏菌 | HLA | 藍綠色 | 31 (96.9) | 白色 | 1(3.1) |
BBL | 藍綠色 | 30 (93.8) | 藍色至藍綠色 | 2(6.2) |
表2. 非單增李斯特菌菌株在不同培養(yǎng)基上的菌落情況
菌株 | 培養(yǎng)基 | 真陰性結(jié)果 (%) | 假陽性結(jié)果(%) |
E. coli O157:H7 | HLA | 10 (100) | 0(0.0) |
BBL | 9 (90.0) | 1(10.0) |
表3. 培養(yǎng)基分離標準菌株的有效性
HLA | BBL | PCR | |
真陽 | 31 | 30 | 31 |
真陰 | 10 | 9 | 9 |
假陽 | 0 | 1 | 1 |
假陰 | 1 | 2 | 1 |
靈敏度 | 96.8% | 93.7% | 96.8% |
特異度 | 100% | 90% | 90% |
有效率 | 97.6% | 92.8% | 95.2% |
表4. 60個尼羅河水樣在不同培養(yǎng)基上單增李斯特菌的假陽性率
分離株數(shù)量 | 假陽性數(shù)(%) | |
HLA | 40 | 2(5.0) |
BBL | 40 | 5(12.5) |
由上表可見,HiMedia的李斯特菌顯色培養(yǎng)基(HiCrome Listeria Agar Base)靈敏度為96.8%,特異度為100%,并已被PCR進一步確證,令人滿意,且好于另外一種品牌的顯色培養(yǎng)基。作者認為,HiMedia的李斯特菌顯色培養(yǎng)基不失為一種靈敏、快速、特異的方法,并且無須任何確證試驗。
HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,具有40多年生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)驗,具有WHO-GMP認證、ISO9001,ISO13485質(zhì)量體系認證和CE、FDA注冊登記。產(chǎn)品已行銷世界上140多個國家。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。