粘菌素耐藥菌顯色培養(yǎng)基

HiCrome™ Colistin Resistant Agar Base

用途

分離和鑒別革蘭氏陰性粘菌素耐藥菌

原理

粘菌素耐藥菌顯色培養(yǎng)基是用于檢測(cè)和鑒別耐粘菌素的腸桿菌科、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌和沙門氏菌。粘菌素被認(rèn)為是后選擇的抗生素，因?yàn)樗懈弊饔?，包括腎毒性和耳毒性，它對(duì)革蘭氏陰性菌具有廣譜的活性。（1,5）。但隨著多發(fā)性耐藥的革蘭氏陰性菌的感染率增加，粘菌素再次成為一種治療制劑。中國(guó)鑒定了由mcr-1 pEtN基因引起的質(zhì)粒介導(dǎo)的粘菌素（COL）耐受（6）。近的臨床數(shù)據(jù)還表明，如果采取某些預(yù)防措施，粘菌素的使用是可接受的（2）。

培養(yǎng)基中的酸水解酪蛋白提供氮源和碳源化合物、長(zhǎng)鏈氨基酸、硫和其他必需營(yíng)養(yǎng)素。摻入的顯色混合物有助于顏色鑒別。顯色底物被粘菌素抗性大腸桿菌產(chǎn)生的β-D-半乳糖苷酶特異性裂解，產(chǎn)生粉紅色至紫色的菌落。而粘菌素抗性肺炎克雷伯菌裂解另一種顯色底物，產(chǎn)生金屬藍(lán)色的菌落。假單胞菌產(chǎn)生的無(wú)色菌落可能含有輕微的綠色的色素。來(lái)自蛋白胨的苯丙氨酸和色氨酸有助于檢測(cè)色氨酸脫氨酶活性，指示變形桿菌、摩根菌和普羅維登西的存在，它們菌落呈現(xiàn)褐色。

該培養(yǎng)基是用作篩選培養(yǎng)基。分離的菌株應(yīng)遵循CLSI指南，進(jìn)一步檢測(cè)分離菌株對(duì)粘菌素的敏感性。

樣本類型

臨床樣本（注：用于體外診斷。該培養(yǎng)基具有CE注冊(cè)登記）

樣本依照相關(guān)指南進(jìn)行處理（3,4）

培養(yǎng)基成分

終pH值（25°C）7.3±0.2

配制 
取38.50克溶1L蒸餾水，加熱至沸使培養(yǎng)基*溶解。15磅121°C高壓滅菌15分鐘。冷卻至45-50°C。加入1管復(fù)溶的添加劑FD355，溶解冷卻后傾注平板。

局限

基于粘菌素、氨芐青霉素、陽(yáng)離子甾體化合物共同的結(jié)構(gòu)特征，可能存在交叉反應(yīng)

和敏感菌株比，粘菌素耐藥菌的MIC值可能升高幾百倍

需要生化試驗(yàn)進(jìn)行終的菌種鑒定

粘菌素耐藥菌需要微量肉湯稀釋法進(jìn)行確證

性能與評(píng)價(jià)

在保質(zhì)期和正確存儲(chǔ)前提下，按照說(shuō)明書(shū)操作，即可保證培養(yǎng)基的性能。

質(zhì)量控制

外觀——淡黃色均勻自由流動(dòng)的粉末

成膠性——牢固，與1.7％瓊脂凝膠相當(dāng)

成品培養(yǎng)基顏色和透明度——平皿中為淡琥珀色，透明或輕微不透明凝膠

配比反應(yīng)——3.85%w/v（3.85g/100ml蒸餾水）水溶液在25℃的pH值為7.3±0.2

規(guī)定pH值——7.10-7.50

培養(yǎng)反應(yīng)

35-37°C 孵育18-24小時(shí)

*為WDCM編號(hào)

參考文獻(xiàn)

1. Cheng YH, Lin TL, Pan YJ, Wang YP, Lin YT, Wang JT.2015. Colistin resistance mechanisms in Klebsiella pneumoniae strains from Taiwan. Antimicrob Agents Chemother 59:2909–2913. doi:10.1128/AAC.04763-14.

2. 2. Falagas ME, Rafilidis PI.2009. Nephrotoxicity of colistin: new insight into an old antibiotic. Clin.Infect. Dis. 48:1729-1721.

3. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 2nd Edition.

4. Jorgensen, J.H., Pfaller , M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.

5. Lim LM, Ly N, Anderson D, Yang JC, Macander L, Jarkowski A, Forrest A, Bulitta JB, Tsuji BT.2010. Resurgence of colistin: a review of resistance, toxicity, pharmacodynamics, and dosing. Pharmacotherapy 30:1279–1291. doi:10.1592/phco.30.12.1279.

6. Liu YY, Wang Y, Walsh TR, Yi LX, Zhang Retal. Emergence of plasmid-mediated colistin resistance mechanism MCR-1 in animals and human beings in China: a microbiological and molecular biological study. Lancet Infect Dis 2016;16